仿制藥一致性評價工作正在如火如荼的開展著，如何測定參比制劑中各輔料的用量是一致性評價中需要重點關注的問題。即所謂逆向工程研究。
仿制藥中的逆向工程是一種產品技術再現過程，即對一目標產品進行逆向分析及研究，從而確定該產品的成分、含量等信息，并推斷出其生產工藝等要素，以生產出功能上相似，但并不完全一樣的產品【1】。
本文將相關研究方法匯總如下：
a. 文獻檢索
1. 詳細調研參比制劑相關信息，包括產品說明書和審評報告，可獲得產品處方。部分歐洲說明書中能獲得個別輔料的用量。下圖為EMC下載的Abilify 5 mg tablets英國說明書截圖。
2.查找(zhao)參比制劑(ji)生產廠家的(de)制劑(ji)專(zhuan)利，有時可獲得(de)詳細的(de)原輔(fu)料用(yong)量及(ji)生產工藝。
3：若該參比(bi)制劑在阿(a)根廷上市，可查閱阿(a)根廷官網：，能查到部分品種的處方輔料用量。可檢測處方中的幾種輔料驗證準確度。
b. 試驗測定
常用的檢測方法有：
常(chang)規方法：重(zhong)量法、溶解性、滴定(ding)法、卡爾費休水分測定(ding)法等
; 儀(yi)器(qi)分(fen)析：HPLC、HPLC-MS、GC、GC-MS、ICP、XRD、掃(sao)描電(dian)鏡、熱(re)分(fen)析、紅外光譜(pu)、拉曼光譜(pu)等。
應用案例：
1. 軟膏劑 趙嬌嬌【1】對英國GSK公司生產的Abreva 軟膏劑進行了逆向工程技術研究。處方中活性藥物成分是二十二烷醇,其他輔料包括苯甲醇、丙二醇、蔗糖硬脂酸酯、輕質液體石蠟和水分。用卡爾費休水分測試儀對水分定量；用氣相色譜檢測方法測定苯甲醇和丙二醇；采用氣相色譜法和液相色譜法檢測蔗糖硬脂酸酯；最后采用減量法來確定輕質液體石蠟的含量。
2. 片劑 李寧【2】對Sanofi的頭孢克肟片（商品名：SUPRAX）進行了逆向工程技術研究。片芯處方輔料為微晶纖維素、硬脂酸鎂、預膠化淀粉及二水磷酸氫鈣。采用ICP-MS測定鈣和鎂含量，從而折算出處方中硬脂酸鎂和二水磷酸氫鈣用量；通過原輔料在水中的溶解性，采用重量法測定微晶纖維素的用量。減重法得到預膠化淀粉用量。
3. 膠囊劑 孫亞洲【3】在報告中提到埃索美拉唑鎂腸溶膠囊的逆向分析方法。腸溶微丸由內至外依次為含藥層、隔離層、腸衣層。
A 腸衣層研究
取適量膠囊碾碎，用PH6.8的緩沖鹽溶解，過濾。取濾液，加酸析出腸溶衣材料，過濾得到固體，干燥，稱重，即得到丙烯酸樹脂重量。取濾渣，加水溶解，過濾，得到的濾渣再加乙醇溶解，過濾，得到水和醇的不溶解物質，即處方中的硬脂酸鎂、滑石粉、碳酸鎂、二氧化鈦。
B 隔離衣層研究
利用溶解性進行研究。處方中丙烯酸樹脂不溶于水，而其他PVP、增塑劑等在冷熱水中均可溶解。但HPMC、HPC溶解于冷水，在熱水中不溶；而聚乙烯醇在冷水中不溶，溶解于熱水。利用這些性質，可對隔離衣層進行定量研究。
C 糖丸芯研究
取本品采用PH6.8的緩沖鹽除去腸溶衣后，改用乙醇等有機溶劑將藥物溶解除去，過濾得到丸芯，干燥、稱重。
參考文獻：
【1】 趙嬌嬌.軟膏劑Abreva成分檢測的逆向工程技術研究.
【2】 李寧.逆向工程研究方法在頭孢克肟片研究中應用.
【3】 孫亞洲.仿制藥及一致性評價處方前研究，劑型特點與相應的處方工藝研究重點解析.
